Vliv hodnoty pH a teploty pyrrolidonu na vodný roztok PVP hraje roli při konzervaci buněčných semen. Správný provoz a vhodné podmínky zmrazování mohou snížit změnu nebo ztrátu charakteristik buněk. Nezesítěný roztok PVP nemá žádnou zvláštní tixotropii, pokud není tixotropní při vysoké koncentraci a nevykazuje velmi krátkou relaxační dobu. Zkušenosti se zmrazením buněk: Výběr správného nástroje pro zmrazení je nejlepší způsob. Zmrazování buněk je technologie, která uchovává buňky v prostředí s nízkou teplotou, snižuje metabolismus buněk a dosahuje dlouhodobého skladování. (Pyrrolidon) U většiny buněčných linií je zahušťovací schopnost PVP úzce spjata s jeho relativní molekulovou hmotností. Za daných koncentračních podmínek platí, že čím větší je relativní molekulová hmotnost, tím větší je jeho viskozita. Buňky se budou i nadále hromadit a měnit se stárnutím a evolucí, což způsobí „kulturní posun“ fenotypu a genotypu. Správné a úspěšné zmrazení hraje důležitou roli při dlouhodobé aplikaci buněk.
Během procesu zmrazování proto správná kultivace a šetrný odběr buněk, před zmrazením by si buňky měly udržet nejlepší růstový stav (v logaritmické nebo exponenciální fázi). V ideálním případě by mělo být kultivační médium vyměněno 24 hodin před sklizní. Doporučuje se zkontrolovat kulturu na mikrobiální kontaminanty, zejména mykoplazmata, aby se zajistilo, že buňky nejsou kontaminovány. Během procesu odběru buněk by měl být experimentální provoz co nejšetrnější, aby nedošlo k poškození buněk. (Pyrrolidon) Vhodný kryoprotektivní prostředek. V současnosti je běžně používanou technologií pro zmrazování buněk kryokonzervace kapalným dusíkem, která využívá především metodu pomalého zmrazování s vhodným množstvím ochranného prostředku pro zmrazení buněk a snížení poškození buněk během procesu zmrazování. Pokud jsou buňky přímo zmrazeny bez ochranného činidla, voda uvnitř i vně buněk rychle vytvoří ledové krystaly, což způsobí řadu nežádoucích reakcí.
Polyvinylpyrrolidon, ethylenglykol, methanol a methylacetamid jsou všechny kryoprotektory. Dimethylsulfoxid (DMSO) a glycerol jsou běžné při kryokonzervaci buněk. Tyto dvě látky mají malou molekulovou hmotnost, vysokou rozpustnost a mohou snadno pronikat do buněk. Mohou snížit bod tuhnutí a zvýšit propustnost buněčných membrán pro vodu. Klíč spočívá v buněčné povaze. (Pyrrolidon) DMSO má obvykle koncentraci 5-10 % (obj./obj.) a optimální koncentrace se u různých buněčných linií liší. Konečná koncentrace glycerolu v mrazicím médiu je 5-15 %. Podobně optimální koncentrace závisí na buněčné linii. Chcete-li zvýšit míru přežití buněk, které je obtížné uchovat, můžete se rozhodnout zvýšit koncentraci séra v konzervačním roztoku během kryokonzervace. Pokud chcete buňky zmrazit rychleji a stabilněji, roztok pro zmrazení buněk by byl dobrou volbou. Není nutná žádná příprava. Stačí k buňkám přidat přiměřené množství zmrazovacího roztoku. Operace je jednoduchá a můžete mít buňky s vysokou životaschopností.
